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內參信息對照表(點擊內參名可查看產品)

內參 樣品類型 分子量(kDa)
beta-actin 全細胞/細胞質 43
GAPDH 全細胞/細胞質 30-40
tubulin 全細胞/細胞質 55
VDCA1/膜孔蛋白 線粒體 31
COXIV 線粒體 16
核纖層蛋白B1 細胞核 66
TATA結合蛋白TBP 細胞核 38


在Western Bloting實驗中,內參即是內部參照(Internal Control)也叫作Loading contorl,對于哺乳動物細胞表達來說一般是指由管家基因編碼表達的蛋白(Housekeeping Proteins),它們在各組織和細胞中的表達相對恒定,在檢測蛋白的表達水平變化時常用它來做參照物。


在Western Blotting 中使用內參其實就是在WB過程中的另外用內參對應的抗體檢測內參,這樣在檢測目的產物的同時可以檢測內參的表達,由于內參在各組織和細胞中的表達相對恒定,借助檢測每個樣品內參的量就可以用于校正上樣誤差,這樣半定量的結果才更為可信。此外使用內參可以作為空白對照,檢測蛋白轉膜情況是否完全、整個Western Blot顯色或者發光體系是否正常。


常用的細胞總蛋白質內參有GAPDH、beta-actin和beta-tubulin等。對于一些植物的樣本,則需要特別的植物Actin蛋白作為內參,同樣的,如果提取的樣本是細胞核蛋白,那么PCNA或者組蛋白H3都是被經常使用的,而針對一些研究線粒體的客戶,那么Cox IV則被較多的文獻引用作為線粒體總蛋白的內部參考。

標簽抗體(點擊內參名可查看產品)

 FLAG
 
 HA
 
 His
 
 V5
 
 GST
 
 Myc
 
 agrose偶聯


標簽抗體,別名為抗原表位,又稱抗原決定簇,是抗原分子中決定抗原特異性的特殊區域或基團,是與抗體特異性結合的結構或序列。隨著生物技術的發展,科研人員可以通過DNA重組技術,構建包含目的基因以及表位標記的融合蛋白,進而通過特異性標簽抗體對其鑒定與純化,以達到研究的需求。


融合標簽根據其相對分子質量大小可以分為兩大類:大的蛋白質分子和小的多肽片段。融合標簽的使用可以簡化蛋白質的純化過程、控制蛋白質固定的空間取向及方便檢測、使體內生物事件可視化、提高重組蛋白質的產量、增強重組蛋白質的可溶性和穩定性等。


 

 

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